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干貨分享:低吸附移液器吸頭的耐化學性
移液的準確性和精確性不僅對吸頭與移液器是否匹配有要求,還需要適合液體的吸頭。當使用標準吸頭(PP)移取表面張力小的液體時容易在吸頭表面留下一層薄膜(如含有清潔劑的液體)。液體的殘留會導致移液結果的不精確、不一致,同時也損失了部分昂貴的樣品。在許多DNA和蛋白質的分析方法中所用到的試劑和樣品通常都含有清潔劑。研發低吸附吸頭就是為了改善液體殘留這個普遍的問題。
不同的廠商使用不同的技術來制造低吸附吸頭,因此其一致性、疏水程度、耐化學性方面各不相同。以下就各廠商的低吸附吸頭的耐化學性作比較。
材料
BUNSEN 標準吸頭:1000μ
BUNSEN 低吸附吸頭:1000μl
其他廠商低吸附吸頭:1000μl
電動移液器: 50-1000μl,以4檔速度吸液、1檔速度排液
化學試劑:異丙醇、乙腈、DMF(二甲基甲酰胺)、綠色食品染料
3個其他廠商的低吸附移液器吸頭
96 孔微孔板分光光度計 (Biotek)
吸光度測試
在吸光度測試中,我們使用染色試劑(溶解于蒸餾水中的綠色食品染料)來測定排液后移液器吸頭中殘余的液體。使用被測吸頭最大標稱體積來吸取綠色試劑。然后直接將該液體排回容器中。接下來以吸頭的最大容量使用蒸餾水漂洗吸頭5 次。然后使用分光光度計 (405 nm) 測定漂洗液的吸光度,并將結果與參考試劑進行對比。漂洗液的吸光度與吸頭中的液體殘留量直接相關。
耐化學性測試
1000 μl 溶劑:使用 1000 μl 移液器吸頭對異丙醇、乙腈和二甲基甲酰胺分別反復吸打 20 次。用蒸餾水將吸頭漂洗 3次。然后使用染色液體作為試劑,利用吸光度測試分析這種處理對低吸附吸頭性能的影響。每種溶劑對 6 個吸頭進行重復測試。將經過化學處理的吸頭的結果與未經處理的標準吸頭和低吸附吸頭進行結果對比。
BUNSEN低吸附移液器吸頭的耐化學性
多種技術被用于創建移液器吸頭的低吸附表面。穩定的方法可生產出疏水且無浸出的吸頭。如圖 1 所示,被測的低吸附吸頭之間在耐化學性方面存在著顯著的差異。一些廠商的吸頭在使用選定溶劑進行處理后低吸附功能會顯著降低?;瘜W測試后 低吸附吸頭的性能與未經任何化學處理時的性能處于相同水平,這表明這些吸頭是惰性的且無浸出。對 Sartorius 低吸附吸頭進行高壓滅菌也不會影響吸頭的性能(數據未顯示)。
低吸附吸頭與 標準吸頭和低吸附吸頭進行對比。根據吸光度測試方法使用 Sartorius Picus 電動移液器(1000 μl) 和 1000 μl 移液器吸頭進行耐化學性測試。對每個供應商的 6 個吸頭進行重復測試。
結論:
市場上的各種低吸附吸頭在耐化學性方面存在顯著的差異。低吸附吸頭具有最佳的耐化學性,確保低吸附性能不受到液體的影響且無浸出。
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